什么是寨卡病毒如果检测预防看完一定记

　导读

年月，智利在复活节岛发现了寨卡病毒感染的首位本土病例。年5月，巴西开始出现赛卡病毒感染疫情。截止年1月6日，有4个国家和地区有疫情报道，其中个在美洲，目前欧洲多国也有报道，有蔓延全球之势。

寨卡病毒1病因

寨卡病毒属黄病毒科，黄病毒属，单股正链RNA病毒，直径0nm，是一种通过蚊虫进行传播的虫媒病毒，宿主不明确，主要在野生灵长类动物和栖息在树上的蚊子，如非洲伊蚊中循环。该病毒最早于年偶然通过黄热病监测网络在乌干达寨卡丛林的恒河猴中发现，随后于年在乌干达和坦桑尼亚人群中发现。该病毒活动一直比较隐匿，仅在赤道周围的非洲、美洲、亚洲和太平洋地区有寨卡病毒感染散发病例。最早一次暴发流行是年发生在西太平洋密克罗尼亚群岛的雅铺岛，更大的一次流行于年-年发生在大洋洲的法属波利尼西亚，感染了约人。伊蚊还传播黄病毒科中的另外三种病毒，包括登革热病毒、基孔肯雅病毒和黄热病毒，也主要在热带和亚热带地区流行。几十年前，非洲的研究者注意到伊蚊传播的寨卡病毒疫情莫名其妙地跟随伊蚊传播基孔肯雅病毒疫情之后。类似的规律开始于年，当基孔肯雅病毒从西到东传播时，寨卡病毒紧跟而来。

临床表现

寨卡病毒病的潜伏期（从接触到出现症状的时间）尚不清楚，可能为数天。寨卡病毒感染者中，只有约0%会表现轻微症状，典型的症状包括急性起病的低热、斑丘疹、关节疼痛（主要累及手、足小关节）、结膜炎，其他症状包括肌痛、头痛、眼眶痛及无力。另外少见的症状包括腹痛、恶心、呕吐、黏膜溃疡和皮肤瘙痒。症状通常较温和，持续不到一周，需要住院治疗的严重病情并不常见。年和年分别在法属波利尼西亚和巴西塞卡疫情期间，有报道称寨卡病毒病可能会造成神经和自身免疫系统并发症。

年巴西的寨卡暴发流行中发现了很多小头畸形的新生儿（出生的新生儿头围与匹配的相同性别和孕龄的孩子比，低于平均值超过了两个标准差）。在年5月-年1月间，共报道例感染寨卡病毒的孕妇分娩了小头畸形儿，与往年小头畸形的比例相比，上升了0倍。35例小头畸形新生儿的头颅CT及头颅超声提示存在弥漫性脑组织钙化，主要发生在侧脑室旁，薄壁组织旁和丘脑区域、基底节区域。皮质和皮质下萎缩造成的脑室萎缩也能见到。小部分婴儿出现关节挛缩，提示周围和中枢神经系统受累。对寨卡疫情开展调查发现，越来越多的证据表明寨卡病毒与小头症之间存有关联。然而，在解释婴儿小头症与寨卡病毒之间的关系之前仍需要做出更多调查。

如何检查寨卡病毒1检查对象

（一）疑似和临床诊断病例。

（二）伊蚊成蚊和幼虫。

样本采集、保存和运输

（一）病例标本采集。

　　对怀疑感染寨卡病毒的患者，推荐采集血清标本开展检测。

用无菌真空干燥管，采集患者非抗凝血5mL，及时分离血清，分装管，保存于带螺旋盖、内有垫圈的冻存管内，标记清楚后低温保存，其中1管用于现场实验室检测，1管用于上级疾病预防控制机构复核。

　　对病例应尽可能采集双份血液标本，两份标本之间相隔14天为宜，住院病例可于入院当天和出院前1天各采集一份。

（二）蚊媒标本采集。

　　疫点内采集的伊蚊成蚊及幼虫，分类鉴定后，填写媒介标本采集信息表，按照采集地点分装，每管10-0只。

（三）标本保存、运送。

　　如标本能够在4小时内开展实验室检测，应将标本置于-8℃保存；如能在7天内开展检测，应将样本置于-0℃保存；如需保存7天以上，应将样本置于-70℃以下。

　　标本运送时采用低温冷藏运输，避免冻融，样本运输应遵守国家关于三类病原体的相关生物安全规定。

3检测方法

　　寨卡病毒病的检测方法包括病毒核酸检测、IgM抗体检测、中和抗体检测和病毒分离等。寨卡病毒与黄病毒属其他病毒具有较强的血清学交叉反应，目前主要采用病毒核酸检测。

开展蚊媒寨卡病毒检测时，对捕获的伊蚊成蚊或幼虫进行病毒核酸检测。

　　开展寨卡病毒实验室检测时，应同时考虑登革病毒和基孔肯雅病毒感染可能。登革病毒和基孔肯雅病毒实验室检测应按照相应的技术指南开展。

（一）临床标本检测

1．病原学检测

病原学检测主要适用于急性期血液标本，一般认为发病7天内检测阳性率高。

（1）核酸检测：采用荧光定量RT-PCR方法，是目前早期诊断寨卡病毒病的主要检测手段。

（）病毒分离：将标本接种于蚊源细胞（C6/36）或哺乳动物细胞（BHK1、Vero）进行分离培养，出现病变以后，用检测核酸的方法鉴定病毒。也可使用乳鼠脑内接种进行病毒分离。

．血清学检测

（1）血清特异性IgM抗体：发病3天后可检出病毒特异性IgM抗体，但发病7天后检出率高。可采用ELISA、免疫荧光等方法检测。IgM抗体阳性，提示患者可能新近感染寨卡病毒，但寨卡病毒IgM抗体与登革病毒、黄热病毒和西尼罗病毒等黄病毒有较强的交叉反应，易于产生假阳性。

（）中和抗体：采用空斑减少中和试验方法检测。患者恢复期血清中和抗体阳转或滴度较急性期呈4倍及以上升高，且排除登革、乙脑等其他常见黄病毒感染，可以确诊。

（二）媒介标本检测

1．标本处理

将分类后的伊蚊成蚊或幼虫，按照采集地点，每10～0只为一份进行研磨处理。

．病毒核酸检测

用RT-PCR的方法进行寨卡病毒核酸检测

3．病毒分离

病毒核酸阳性的标本进行病毒分离。

4生物安全

　　寨卡病毒在我国归属于三类病原体，应在生物安全二级实验室（BSL-）开展实验室检测。应按照《病原微生物实验室生物安全管理条例》等相关规定要求，做好生物安全防护工作。

年以来美洲多个国家相继发生寨卡病毒（Zika）感染病例，世界卫生组织近日警告，寨卡病毒正呈现“暴发式传播”，预计美洲地区将有至多万人感染这种病毒。截至目前，中国大陆尚未发现病例，但疾病预防控制中心指出我国仍存在病例输入风险。

　　目前关于这种病毒传播的疑问不少，比如怀孕期间感染与造成婴儿小头畸形之间的关联，但由于目前诊断方法的局限性，还很难给出一个答案来。一组研究人员正在攻关，希望能以最快的速度研发出免疫试剂，检测是否感染Zika病毒。

　　来自德州大学加尔维斯顿医学分校的NikosVasilakis表示，“我们正尽全力尽快给临床医师们一些答案。”

　　目前，检测寨卡病毒的标准检测方法是对样本进行PCR，分析样本中的病毒RNA探针是否存在，虽然这种方法能很好的检测到病毒，但是病原体的RNA很快就会被降解掉。“在患者把样品送入临床时，病毒也许已经消失，或者只能抓住它的尾巴了，这超过了检测时间限制，”Vasilakis说。

　　临床医师和流行病学家希望能在出生前几个月里就确定婴儿是否感染了寨卡病毒，为此美国疾病控制与预防中心CDC的科学家们进行了一种称为蚀斑减少中和试验(PlaqueReductionNeutralizationTest)的检测，这种方法是检测血清中和抗体的一种敏感性较高的方法，能检测之前的感染。

　　从原理上说，这一检测方法以使蚀斑数减少50％的血清稀释度作为其中的效价。试验使用定量的病毒(PFU)与不同稀释度的等量血清混合后感作,接种预先准备好的单层细胞，再覆盖上营养琼脂置37度二氧化碳培养箱培养，数天后分别统计蚀斑数，用Karber法计算该血清的蚀斑中和效价。

　　患者的血清中混有病毒，几天时间里研究人员观察病毒是否会感染培养基，如果没有，那么病毒就已经被血清中的抗体中和了，这表明患者曾经接触过寨卡病毒。

　　CDC甲类病毒实验室主任AnnPowers表示，使用这种方法的问题在于“你必须有活体病毒，和合适安全的环境，”这意味着只有少数几个实验室能进行这种试验。

　　其它更加方便的血清学测试也能检测特定病原体中的抗体，但是对于寨卡病毒来说，很难判断患者携带的黄病毒是登革热病毒，寨卡病毒还是其它病毒。“而且寨卡病毒出去的区域也正是登革热出现的地区，”来自华盛顿大学圣路易斯分校的免疫学家MikeDiamond说。

　　Vasilakis正在尝试ELISA方法，也就是检测体液中微量物质的固相免疫测定的方法，这种方法利用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接，然后通过酶与底物产生颜色反应，用于定量测定，可以在感染后几个星期内检测到Zika病毒。虽然这也有可能会与其它感染发生一定程度的交叉反应，但如果Zika病毒特异性抗体浓度高就能指示出近期发生的Zika病毒感染，Vasilakis说。

　　Vasilakis预计在未来几周内，Diamond研究组就会有结果，研发出一种针对Zika病毒的单克隆抗体检测方法，这能与ELISA方法结合，检测发生过的感染，“我们很早就开展了这项研究，这个月就能得到结果，”Diamond说，“初步结果表明我们的一些抗体能特异性识别Zika病毒。”

　　不过即使Diamond研究组的抗体能特异性检测Zika病毒，他们也需要一些时间来建立诊断方法，“这可能还需要几个月的时间。”

　　与此同时，一些生物公司也开始销售Zika血清学检测，比如MyBioSource公司已经有售一种针对Zika的IgMELISA检测，来自加拿大的Biocan公司也在出售一种检测IgM和IgG抗体（后者比前者在感染后提升水平更高）的扎手指检测方法，能在5到10分钟得到结果。

　　Diamond表示他们还未接触任何商业产品，Biocan目前还未给出有效数据，但是其销售部总经理BhavjitJauhar表示他们已经将实验室和现场检测结果呈递给巴西监管当局，“我们过去几年间一直致力于Zika病毒的研究，因为我们认为这种疫情会暴发。”

综合整理于网络，侵删

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